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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞

產(chǎn)品簡介:

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:泛素結(jié)合酶E2J1抗體 人胚肺成纖維細(xì)胞 14號染色體開放閱讀框146抗體 小鼠破骨細(xì)胞 MED25蛋白抗體 小鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞 KLHDC8A蛋白抗體 小鼠白血病細(xì)胞;P388

產(chǎn)品型號:

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:634

更新時間:2024-11-05

產(chǎn)品特性Product characteristics

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

臍帶

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X8412

細(xì)胞簡介:

兔臍動脈平滑肌分離自臍帶組織;它是臍動脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,同時從臍帶中分離臍靜動平滑肌細(xì)胞方法相對成熟,使得體外培養(yǎng)的臍動脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞。臍動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

方法簡介:

實驗室分離的兔臍動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔臍動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:貼壁

細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣

傳代特性:可傳3代左右

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO25%

兔臍動脈平滑肌體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)試劑盒

兔子前列腺素E2(PGE2)試劑盒

兔子前列腺素E1(PGE1)試劑盒

兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒

溶質(zhì)載體家族蛋白38成員A10抗體

19號染色體開放閱讀框70抗體

TREM2重組小鼠 TREM2 蛋白 Protein

ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥 0.5mgATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原

KIAA0101重組人 KIAA0101 / p15 / PAF 蛋白 Protein

GAP43 Protein Human 重組人 GAP43 / Neuromodulin 蛋白

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白

ATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥 0.5mgATEXPA10 peptide 植物擴張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原

GAP43 Protein Human 重組人 GAP43 / Neuromodulin 蛋白

TREM2重組小鼠 TREM2 蛋白 Protein

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白

KIAA0101重組人 KIAA0101 / p15 / PAF 蛋白 Protein

小鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)ELISA pcr檢測試劑盒

Human hyaluronic acid (HA) ELISA Kit 人透明質(zhì)酸(HA)試劑盒

Humanpyruvatekinase,PKELISAKit 人酸激酶(PK)pcr檢測試劑盒分裝

Humancadherln-relatedneuronalreceptor1,C-1試劑盒人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(C-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T

質(zhì)粒/蛋白制備樣品內(nèi)毒素凝膠法定量試劑盒20

Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔臍動脈平滑肌細(xì)胞大鼠血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)試劑盒 ,英文名: VEGFR1 ELISA Kit

Mouse chemokine (FK) ELISA Kit 小鼠趨化因子(FK)試劑盒

Mousemonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAkit 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforHumanBetaamyloidprecursorprotein,BetaAPPELISAKit人淀粉樣前體蛋白

細(xì)胞EBV(EPSTEIN-BARR)病毒定性試劑盒20

ELISAKitLDL-IC大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行


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