服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問上海研生實業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:633
更新時間:2024-11-05
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠頜骨成纖維細(xì)胞
組織來源:頜骨
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠頜骨成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介:
小鼠頜骨成纖維分離自頜骨組織;頜骨,是指頜部的骨頭,分為上頜骨和下頜骨。構(gòu)成口腔上下部的骨頭和肌肉組織,上部叫上頜,下部叫下頜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠頜骨成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠頜骨成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠 英文名稱: Cytochrome C 英文縮寫: Cytochrome C
小鼠超敏C反應(yīng)蛋白 英文名稱: Mouse C Reactive Protein HS 英文縮寫: CRP-hs
小鼠鈣蛋白 英文名稱: Mouse Calprotectin 英文縮寫: CP
小鼠細(xì)胞表面分子CD100 英文名稱: Mouse cluster of differeiation 100 英文縮寫: CD100
補(bǔ)體C2抗體
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B
IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein
CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原
SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein
CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白
CK17(Cytokeratin 17 0.5mgCK17(Cytokeratin 17) 細(xì)胞角蛋白17抗原
CDKN2D Protein Human 重組人 CDKN2D / p19ink4d 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
IgG1重組小鼠 IgG1-Fc 蛋白 (102 Cys/Ser) Protein
FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白
SERPINB4重組人 SerpinB4 蛋白 Protein
小鼠2(VD2)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat bone specific alkaline phosphatase B (ALP-B) ELISA Kit 大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒
Humanproteindisulfide-isomeraseA3,PDIA3ELISAKit 人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)pcr檢測試劑盒分裝
ChickenJapaneseEncephalitisIgG,JEIgG試劑盒雞流行性乙型腦抗體IgG(JEIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞INSULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseghcagons-likepepfide1,GLP-1ELISAKit小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠頜骨成纖維細(xì)胞人中期因子(MK)ELISA 試劑盒
People / endotoxin lipopolysaccharide (LPS) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)試劑盒
Humanmelanocyteaibody,MCAbELISAKit 人黑色素細(xì)胞抗體(MCAb)pcr檢測試劑盒分裝
HumanHydrocoisone,HYD試劑盒人(HYD)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織肌酸激酶(CK)活性酶動力比色法定量試劑盒25次
Humanlipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作
下一篇:小鼠冠狀動脈成纖維細(xì)胞